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产品货号 |
产品名称 |
包装规格 |
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BLE022-1A-5KU |
Taq DNA聚合酶 |
5KU/1ml |
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BLE022-1A-10KU |
10KU/2ml |
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BLE022-1A-20KU |
20KU/4ml |
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BLE022-1A-100KU |
100KU/20ml |
Taq DNA聚合酶（Taq DNA Polymerase）是一种高效的PCR DNA聚合酶，来源于克隆有水生噬热菌（Thermu aquaticus） DNA 聚合酶基因的大肠杆菌，具有很高的热稳定性，与天然Taq DNA聚合酶有相同的功能，该酶具有5’→3’的聚合酶活性和双链特异性5’→3’的核酸外切酶活性，扩增效率高，稳定性好，常用于DNA片段的PCR扩增、DNA标记、引物延伸、序列测定、平末端加A，产物可以直接用于T/A载体克隆。该酶无3′-5′外切酶活性。
产品名称
Taq DNA聚合酶（Taq DNA Polymerase）
酶学编号
EC 3.1.3.1
CAS编号
9012-90-2
来 源
水生噬热菌（Thermu aquaticus）
形 态
溶液（含50％甘油）
酶 活
5U/μl
纯 度
≥99%（SDS-PAGE）
单位定义
1个活性单位（U）是指指以合成的发夹型寡核甘酸序列作为模板/引物，在74 °C，8 min内，将1.17 nmol脱氧核甘酸聚合成双链DNA中所需的酶量。
用 途
常规 PCR 鉴定。
小片段目标基因克隆
标记 DNA 3’-末端
平端 PCR 产物加“A”
T/A载体克隆。
建 议
1）每50 微升反应体系中，酶用量为 0.5-1 微升最好，酶量少可能扩增效率低下!
2）由于PCR反应非常灵敏可以扩增目的基因序列超过1000万倍，在使用Taq DNA酶时请注意避免微量待扩增DNA的污染，并尽量考虑设置不加模板的空白对照以确认是否有待扩增DNA的污染。
贮藏条件
温度：-25℃~ -10℃保存 （注：避免温度低于-25℃发生冻结；若长时间冻结会导致活性部分丧失）
有效期：24个月
推荐使用条件
储存缓冲液：20 mmol/L Tris-HCl (pH8.0), 100 mmol/L KCl, 1 mmol/LDTT, 0.1 mmol/L EDTA, 0.5% NP-40, 0.5% Tween20, 50% （v/v）甘油。
10×PCR Buffer：100 mmol/L Tris-HCl（pH9.0), 500 mmol/L KCl, 0.5%NP- 40, 0.5% Tween-20, 15 mmol/L MgCl2。
注意事项：
1）失活或抑制：酚氯仿抽提可以使Taq DNA 聚合酶失活，加入脱氧胆酸钠至0.06%，SDS至0.01%，或sarkosyl至0.02%均可以抑制Taq DNA 聚合酶
a、模板太多或太少；
b、样品中存在 Mg2+络合剂，导致 Mg2+实际浓度过低；
c、PCR 仪温度不准；
d、样品中含有未知的 Taq 酶抑制剂；
e、引物部分降解；
f、dNTP 部分降解；
g、Taq 酶用量太大等。
