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产品货号 |
产品名称 |
包装规格 |
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BLE021-2B-20U |
热敏感碱性磷酸酶（TAB 5） |
20U/20μl |
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BLE021-2B-100U |
100U/100μl |
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BLE021-2B-1KU |
1KU/1ml |
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BLE021-2B-20KU |
20KU/20ml |
来源于嗜冷海洋细菌（Antarctic Bacterium TAB 5）热敏感碱性磷酸酶（Heat Sensitive Phosphatase Alkaline）常被称作热敏感碱性磷酸酯酶(EC 3.1.3.1)，是一类水解酶，通过水解磷酸单酯将底物分子上的磷酸基团除去，并生成磷酸根离子和自由的羟基，其去磷酸化作用的底物包括核苷酸、蛋白质和生物碱等，并在碱性条件下最为有效。该酶是一组同功酶的统称。常见的小牛肠碱性磷酸酶(Calf Intestinal Alkaline) 被广泛用于二抗等的标记，最终用于蛋白和核酸等的检测，也常用于去除RNA或DNA的5-末端的磷酸基，去除载体DNA片段的5-末端磷酸基，防止线状DNA自身环化。
Antarctic Bacterium TAB 5碱性磷酸酶是一种热敏感的碱性磷酸酶，在 70℃ 下加热 5 min 就会完全不可逆失活，因此在分子生物学实验中在开始连接反应或末端标记实验之前无需对该酶进行去除操作，通过简单的热变性处理即可。
产品名称
热敏感碱性磷酸酶（TAB 5）
酶学编号
EC 3.1.3.1
CAS编号
9001-78-9
来 源
嗜冷海洋细菌（Antarctic Bacterium TAB 5）
形 态
溶液（含50％甘油）
酶 活
1U/μl
纯 度
≥90%（SDS-PAGE）
单位定义
1个活性单位（U）是指在25℃条件下，10分钟能使1μg经 HindIII（产生5’突出末端）消化的 pUC19 DNA 去磷酸化所需的酶量。（去磷酸化标准是指在自连接反应中能抑制＞95%的DNA 再连接。）
贮藏条件
温度：-25℃~ -10℃保存 （注：避免温度低于-25℃发生冻结；若长时间冻结会导致活性部分丧失）
有效期：24个月
用 途
通过去除载体或DNA片段5′末端的磷酸基团，防止载体或DNA片段自连；
质粒DNA同时进行内切酶消化和脱磷；
通过5′末端脱磷，为5′末端磷酸化放射性标记准备模板；
去除DNA、RNA 5′或3′末端的磷酸基团。
注意事项：
失活抑制：70℃加热5分钟可以使碱性磷酸酶失活。金属离子螯合剂对碱性磷酸酶有抑制作用。
推荐合作条件
储存缓冲液：20 mmol/L Tris-HCl (pH8.0), 20 mmol/L NaCl, 50%(v/v)甘油。
